番茄紅素是形成番茄成熟果實及其制品顏色特性的主要色素,其含量可作為果實顏色性狀研究的一個指標。為了對番茄果實番茄紅素的含量進行定量的分析,就可以借助于便攜式精密色差儀。本文介紹了便攜式精密色差儀在番茄果實番茄紅素含量分析中的應用。
番茄紅素是一種脂溶性的類胡蘿卜素,具有較強的抗氧化性,對人類內皮細胞的凋亡、腫瘤的發生有抑制作用。最新研究還表明,限制食用番茄紅素可導致氧化應激的顯著增加并促使骨骼釋放鈣離子。番茄果實中番茄紅素含量豐富,是天然番茄紅素的主要來源。在番茄果實品質性狀的研究中,番茄紅素含量是重要指標之一。常用的番茄紅素測定方法主要有分光光度計法和高效液相色譜法,均需要進行樣本處理和番茄紅素提取。為了提高測定效率、避免破壞樣品,采用快速無損檢測番茄紅素含量就顯得非常的重要,而色差儀法正好可以滿足這一需求。
色差儀法就是通過使用色差儀,自動比對標準樣板與被檢品之間的顏色差異,直接輸出CIELAB的L、a、b三組數據,根據L、a、b值判別顏色及其亮度。色差儀操作簡單快捷,是目前適宜進行顏色無損檢測的儀器,能夠對番茄果實顏色進行精確測量。
用色差儀測定番茄果實的顏色,獲得L、a、b值。隨機選擇充分成熟的果實,沿果面赤道一周均勻取3個點,得出L、a、b的數值后取平均值。每份材料測定3個果實,每個果實重復測定3次。色差儀的3個讀數分別具有不同的功能。L值反映顏色的明亮程度,0表示黑色,100表示白色。a值反映紅色或綠色物質的濃度,a>0表示顏色偏紅,a<0表示顏色偏綠。b值反映橙色或藍色物質的濃度,b>0表示顏色偏橙,b<0表示顏色偏藍。
色度值反映色素的濃度,色度越大,顏色越鮮艷;色調值反映紅橙綠藍紫等顏色類型以及這些基本色之間的過渡顏色,180°表示純綠色,90°表示橙色,45°表示橘紅色,0°表示純紅色;色光值反映物質的表面顏色。根據測定的a、b及L值分別計算a/b和(a/b)2,并可根據以下公式計算色度值、色調值和色光值:
色度值=(a2+b2)1/2;
色調值=tan-1(b/a)(a>0且b>0);
色光值=2000×a/L×(a2+b2)1/2。
通過色差儀測量的L、a、b,根據相關的計算公式,就可以對番茄紅素的含量進行估測。利用色差儀快速定量分析番茄果實中番茄紅素含量的方法。這不僅有利于育種家們快速方便地初選高番茄紅素含量的優良基因型,從而提高育種效率,而且也為番茄果實番茄紅素含量的測定提供了一種快速無損的方法。
該法是借助色差儀,從亮度、紅綠程度和黃藍程度三個不同顏色變化方向,對果實表面顏色進行描述和測定,每個樣品測定結果都含有I、a和b三個值。目前,該法除了在番茄上,還在其他多種園藝作物,如茄子、黃瓜、辣椒等的果實表面顏色測定中有著廣泛的應用。
存在不足是在果色遺傳研究過程中,對所建立的雜交后代分離群體進行測量時,每個樣品的測定結果,都有三個指標,即不能把顏色用一個確切數值表示出來,造成后期果色分級和分類時,L、a和b的范圍存在一定的重疊,即在一定水平上降低了分析結果的準確性。
首先需要把色差儀放在一個平穩的工作臺上,接通電源后開機
每天打開色差儀時,均可在顯示屏看到一個校正提示。初始校正可以反復按向下箭頭鍵直至菜單顯示,然后當“儀器校正”被高光后,按測試鍵。根據測量物品設置校正時間,比較精準的建議每次開機校正一次。
在校正后,應立即將切換模式開關扳至問號圖標指示的位置進入設置模式,測量已經賦值的番茄紅色板。標準應測出在所賦L、a、b值的±0.2以內。并且利用向上/向下箭頭輸入番茄紅色板的賦值作為標準。
切換“模式開關”至測試位,如色差儀已進入待機模式,則按測試鍵開啟,把樣品杯孔扳放在測試孔上校正色差儀,按向下箭頭鍵直至得到在頂部列出設臵名稱的屏幕,按左或右箭頭鍵直至所需的設臵顯示。例如要測量醬,按左或右箭頭鍵直至屏幕頂部顯示“番茄醬”,攪和番茄產品使其均勻,但不要把空氣引入樣品,番茄糊在測量前只可用蒸餾水稀釋到Brix為8.5,將樣品注入或舀入2.5英寸(64mm)玻璃樣品杯直至杯幾乎滿,將樣品杯放在樣品孔板的凹陷區,用樣品杯不透明罩罩住樣品杯; 按測試鍵測量樣品;
如果想要打印測量值,按向上箭頭/打印鍵。按此鍵也將保存測量到數據庫;
從樣品口移去樣品杯,并小心洗滌后晾干。
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